2 × Pfu ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಶ್ರಣ

ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಪ್ಯೂರ್ ಹೈ ಫಿಡೆಲಿಟಿ ಟಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್.

Pfu ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಇ.ಕೋಲಿಯಿಂದ ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಿದ ಪೈರೋಕೊಕಸ್ ಫ್ಯೂರಿಯೋಸಿಸ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ವಂಶವಾಹಿಯೊಂದಿಗೆ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಕಾಲಮ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣದಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. Pfu 3′-5 ′ ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದರಿಂದ, ಇದು DNA ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡ್ ಮಾಡಬಹುದು, ಆದರೆ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ವೆಂಟ್, ಡೀಪ್ ವೆಂಟ್, Tli, UITma, ಇತ್ಯಾದಿಗಳಂತಹ ಇತರ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳು ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೂ, Pfu ಇದುವರೆಗೆ ಕಂಡುಬಂದಿರುವ ಎಲ್ಲಾ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ದರವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. Pfu DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಸಾಮಾನ್ಯ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಿಂತ ಉತ್ತಮ ಉಷ್ಣ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಮತ್ತು ಇದು 90% ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು 95 ° C ನಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆ ಕಾಲ ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದು.

ಒನ್-ಟ್ಯೂಬ್ Pfu PCR ಮಿಕ್ಸ್ (ರಾಷ್ಟ್ರೀಯ ಹೈಟೆಕ್ ಉತ್ಪನ್ನ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣ)

F Pfu PCR ಮಿಶ್ರಣವು PCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣವಾದ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ GC ವಿಷಯ, ದ್ವಿತೀಯ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಮುಂತಾದವುಗಳೊಂದಿಗೆ ವರ್ಧಿಸಬಹುದು. ಉದ್ದೇಶಿತ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ 2 ಪ್ರತಿಗಳಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ವರ್ಧಿಸಬಹುದು, ಹೆಚ್ಚು ನಿಖರವಾದ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸುತ್ತದೆ.

P ಅನನ್ಯ Pfu ಮಾಸ್ಟರ್‌ಮಿಕ್ಸ್ ಸೂತ್ರವು ಇಡೀ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಹಳ ಸ್ಥಿರವಾಗಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು 4 ° C ನಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಥಾ ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಶೇಖರಣೆಯಿಂದ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವುದಿಲ್ಲ.

Stable ಸ್ಥಿರ ಮತ್ತು ದಕ್ಷ ಪೂರ್ವ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಶ್ರಣ ಪರಿಹಾರವು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ವೇಗವಾಗಿ ಮತ್ತು ಸರಳವಾಗಿಸಬಹುದು, ಕಾರ್ಮಿಕ ತೀವ್ರತೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ದೋಷವನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಉನ್ನತ-ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧಕ ಮತ್ತು ಆಪ್ಟಿಮೈಜರ್ ಅನ್ನು ಸಹ ಮಿಶ್ರಣದಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಪಿಸಿಆರ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಅಗತ್ಯತೆಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

■ ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಬಣ್ಣ-ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಮತ್ತು ಬಣ್ಣರಹಿತ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಡೈ-ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪಿಸಿಆರ್ ಮಿಕ್ಸ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಪಿಸಿಆರ್ ನಂತರ ನೇರವಾಗಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರ್ಸ್ ಮಾಡಬಹುದು, ಮಾದರಿ ಬಫರ್ ಸೇರಿಸದೆಯೇ.

ಬೆಕ್ಕು ಇಲ್ಲ	ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಗಾತ್ರ
4992780	1 ಮಿಲಿ
4992781	5*1 ಮಿಲಿ
4992782	1 ಮಿಲಿ
4992906	5*1 ಮಿಲಿ

ನಮಗೆ ಇಮೇಲ್ ಕಳುಹಿಸಿ

ಉತ್ಪನ್ನ ವಿವರ

ಕೆಲಸದ ಹರಿವು

FAQ

ಉತ್ಪನ್ನ ಟ್ಯಾಗ್‌ಗಳು

ಚಟುವಟಿಕೆಯ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ

1 ಯುನಿಟ್ (ಯು) ಪಿಎಫ್‌ಯು ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು 10 nmol ಡಿಯೋಕ್ಸಿನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಆಸಿಡ್-ಕರಗದ ಪದಾರ್ಥಗಳಾಗಿ 74 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಸಕ್ರಿಯ ಸಾಲ್ಮನ್ ಸ್ಪರ್ಮ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್/ಪ್ರೈಮರ್ ಆಗಿ ಬಳಸುವುದಕ್ಕೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ ಎಂದು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ

SDS-PAGE ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆಯಿಂದ ಶುದ್ಧತೆಯು 99%ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು; ಹೊರಗಿನ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್‌ನ ಯಾವುದೇ ಚಟುವಟಿಕೆ ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ; ಮಾನವ ಜೀನೋಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಿಂಗಲ್-ಕಾಪಿ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ವರ್ಧಿಸಬಹುದು; ಒಂದು ವಾರದವರೆಗೆ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದಾಗ ಯಾವುದೇ ಗಮನಾರ್ಹ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಯಿಲ್ಲ.

ಮುಖ್ಯ ತಾಂತ್ರಿಕ ನಿಯತಾಂಕಗಳು

ಇದು 3′-5 ′ ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು 5′-3 ′ ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ. ಡಿಎನ್‌ಎ ವರ್ಧನೆಯ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ವೇಗವು ಟಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ, ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪಿಎಫ್‌ಯು ಕಿಣ್ವದ ವಿಸ್ತರಣೆಯ ವೇಗವು ಪ್ರತಿ ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 0.5-1 ಕೆಬಿ ಆಗಿರುತ್ತದೆ. Pfu ನ ಉಷ್ಣದ ಸ್ಥಿರತೆಯು Taq ಗಿಂತ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ GC ವಿಷಯವಿರುವ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳಿಗಾಗಿ, ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು 98 ° C ಗೆ ಹೆಚ್ಚಿಸಬಹುದು, ಇದು Pfu ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೇಲೆ ಯಾವುದೇ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವುದಿಲ್ಲ. ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನವು ಮೊಂಡು-ಅಂತ್ಯವಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಟಿಎ ವೆಕ್ಟರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಜೋಡಿಸುವ ಮೊದಲು ಅಥವಾ ಮೊಂಡಾದ-ಅಂತ್ಯದ ವೆಕ್ಟರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು 3'-ಡಿಎ ಓವರ್‌ಹ್ಯಾಂಗ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸೇರಿಸಬಹುದು.

ಅರ್ಜಿಗಳನ್ನು

ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ, ಸೈಟ್-ನಿರ್ದೇಶಿತ ರೂಪಾಂತರ, ಸಿಂಗಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಪಾಲಿಮಾರ್ಫಿಸಮ್ (ಎಸ್‌ಎನ್‌ಪಿ) ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಅಂತಿಮ ದುರಸ್ತಿಗಳಂತಹ ಡಿಎನ್‌ಎಯ ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆ ವರ್ಧನೆಗೆ ಇದನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.

ಎಲ್ಲಾ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ODM/OEM ಗಾಗಿ ಕಸ್ಟಮೈಸ್ ಮಾಡಬಹುದು. ವಿವರಗಳಿಗಾಗಿ,ದಯವಿಟ್ಟು ಕಸ್ಟಮೈಸ್ಡ್ ಸೇವೆ (ODM/OEM) ಕ್ಲಿಕ್ ಮಾಡಿ

ಹಿಂದಿನದು: ಫಾಸ್ಟ್ ಸೈಟ್-ನಿರ್ದೇಶಿತ ಮ್ಯುಟಜೆನೆಸಿಸ್ ಕಿಟ್

ಮುಂದೆ: ಅಲ್ಟ್ರಾ ಹೈಫಿಡೆಲಿಟಿ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಿಟ್

1kb ತುಣುಕನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲು ಜೀನೋಮಿಕ್ DNA ಅನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಆಗಿ ಬಳಸಿ.
ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ನಂತರ, ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ 5 μl ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ.

ಪ್ರ: ಯಾವುದೇ ವರ್ಧಕ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳಿಲ್ಲ

A-1 ಟೆಂಪ್ಲೇಟು

Temp ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ಅಥವಾ ಟಕ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇತ್ಯಾದಿ ——— DNA ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ ಅಥವಾ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಿಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ.

Temp ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿಲ್ಲ -— ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಮತ್ತು ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ.

Mp ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅವನತಿ —— ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಪುನಃ ತಯಾರಿಸಿ.

ಎ -2 ಪ್ರೈಮರ್

Pri ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಕಳಪೆ ಗುಣಮಟ್ಟ —— ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಪುನಃ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿ.

Mer ಪ್ರೈಮರ್ ಅವನತಿ —— ಸಂರಕ್ಷಣೆಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಿ. ಬಹು ಘನೀಕರಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಕರಗುವಿಕೆ ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ 4 ° C ಕ್ರಯೋಪ್ರೆಸರ್ವ್ ಮಾಡುವುದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.

Pri ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಅಸಮರ್ಪಕ ವಿನ್ಯಾಸ (ಉದಾ. ಪ್ರೈಮರ್ ಉದ್ದವು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ನಡುವೆ ಡೈಮರ್ ರೂಪುಗೊಂಡಿದೆ, ಇತ್ಯಾದಿ) -ಮರುವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು (ಪ್ರೈಮರ್ ಡೈಮರ್ ಮತ್ತು ಸೆಕೆಂಡರಿ ಸ್ಟ್ರಕ್ಚರ್ ರಚನೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ)

A-3 Mg²⁺ಏಕಾಗ್ರತೆ

ಎಂಜಿ²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ —— Mg ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ²⁺ಏಕಾಗ್ರತೆ: Mg ಅನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಿ²⁺ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ²⁺ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

ಎ -4 ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ

An ಹೆಚ್ಚಿನ ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವು ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಬಂಧನದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ. -— ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 2 ° C ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಿ.

ಎ -5 ವಿಸ್ತರಣೆ ಸಮಯ

Extension ಚಿಕ್ಕ ವಿಸ್ತರಣೆ ಸಮಯ —— ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ.

ಪ್ರ: ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ

ವಿದ್ಯಮಾನ: samplesಣಾತ್ಮಕ ಮಾದರಿಗಳು ಕೂಡ ಗುರಿ ಅನುಕ್ರಮ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ.

ಎ -1 ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಲಿನ್ಯ

Target ಗುರಿಯ ಅನುಕ್ರಮ ಅಥವಾ ವರ್ಧನೆಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಅಡ್ಡ ಮಾಲಿನ್ಯ -— ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ನೆಗೆಟಿವ್ ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ನಲ್ಲಿ ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಹೊಂದಿರುವ ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ಅನ್ನು ಪೈಪ್ ಮಾಡಬೇಡಿ ಅಥವಾ ಅವುಗಳನ್ನು ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ ನಿಂದ ಚೆಲ್ಲಬೇಡಿ. ಕಾರಕಗಳು ಅಥವಾ ಸಲಕರಣೆಗಳನ್ನು ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ತೊಡೆದುಹಾಕಲು ಆಟೋಕ್ಲೇವ್ ಮಾಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಸ್ತಿತ್ವವನ್ನು ನಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಮೂಲಕ ನಿರ್ಧರಿಸಬೇಕು.

Ag ಕಾರಕ ಮಾಲಿನ್ಯ --— ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.

ಎ -2 ಪ್ರಧಾನr

ಎಂಜಿ²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ —— Mg ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ: Mg ಅನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಿ²⁺ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ²⁺ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

Pri ಅಸಮರ್ಪಕ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ, ಮತ್ತು ಉದ್ದೇಶಿತ ಅನುಕ್ರಮವು ಗುರಿಯಲ್ಲದ ಅನುಕ್ರಮದೊಂದಿಗೆ ಹೋಮಾಲಜಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. —— ಮರು-ವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು.

ಪ್ರ: ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆ

ವಿದ್ಯಮಾನ: ಪಿಸಿಆರ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಗಾತ್ರಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ದೊಡ್ಡದು ಅಥವಾ ಚಿಕ್ಕದು, ಅಥವಾ ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ಸಂಭವಿಸುತ್ತವೆ.

ಎ -1 ಪ್ರೈಮರ್

Pri ಕಳಪೆ ಪ್ರೈಮರ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ

—— ಮರು-ವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್.

Pri ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಮತ್ತು ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ.

A-2 Mg²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ

M ದಿ ಎಂಜಿ²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— Mg2+ ಏಕಾಗ್ರತೆಯನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ: Mg ಅನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಿ²⁺ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ²⁺ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

ಎ -3 ಥರ್ಮೋಸ್ಟೇಬಲ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್

En ಅತಿಯಾದ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ —— 0.5 ಕಿ ಯ ಅಂತರದಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ.

ಎ -4 ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ

Ne ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವು ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ——ಅನೀಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಅಥವಾ ಎರಡು ಹಂತದ ಅನೀಲಿಂಗ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ

ಎ -5 ಪಿಸಿಆರ್ ಚಕ್ರಗಳು

P ಹಲವಾರು ಪಿಸಿಆರ್ ಆವರ್ತಗಳು —— ಪಿಸಿಆರ್ ಆವರ್ತಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ.

ಪ್ರ: ತೇಪೆ ಅಥವಾ ಸ್ಮೀಯರ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು

ಎ -1 ಪ್ರೈಮರ್—— ಕಳಪೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ —— ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಮರು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿ, ಪ್ರೈಮರ್‌ನ ಸ್ಥಾನವನ್ನು ಮತ್ತು ಉದ್ದವನ್ನು ಅದರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಬದಲಾಯಿಸಿ; ಅಥವಾ ನೆಸ್ಟೆಡ್ ಪಿಸಿಆರ್ ನಿರ್ವಹಿಸಿ.

A-2 ಟೆಂಪ್ಲೇಟು DNA

—— ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಶುದ್ಧವಲ್ಲ —— ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಿಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ.

A-3 Mg²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ

——Mg²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— Mg ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ²⁺ ಏಕಾಗ್ರತೆ: Mg ಅನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಿ²⁺ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ²⁺ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

A-4 dNTP

——DNTP ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— dNTP ಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ

ಎ -5 ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ

—— ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ ——ಅನೀಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ

ಎ -6 ಚಕ್ರಗಳು

—— ಹಲವು ಚಕ್ರಗಳು —— ಸೈಕಲ್ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಿ

ಪ್ರಶ್ನೆ: 50 μl ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಎಷ್ಟು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸೇರಿಸಬೇಕು?

ಪ್ರ: ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ವರ್ಧಿಸುವುದು ಹೇಗೆ?

ಸೂಕ್ತವಾದ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ಮೊದಲ ಹಂತವಾಗಿದೆ. 3'-5 'ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಕೊರತೆಯಿಂದಾಗಿ ನಿಯಮಿತ ಟಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡ್ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಅಸಾಮರಸ್ಯವು ತುಣುಕುಗಳ ವಿಸ್ತರಣೆ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ನಿಯಮಿತ ಟಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ 5 ಕೆಬಿಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾದ ಗುರಿ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ವಿಶೇಷ ಮಾರ್ಪಾಡು ಅಥವಾ ಇತರ ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಟಾಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕಿನ ವರ್ಧನೆಯ ಅಗತ್ಯತೆಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸಲು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು. ಇದರ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ, ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕುಗಳ ವರ್ಧನೆಗೆ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ, ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯ, ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಸಮಯ, ಬಫರ್ ಪಿಹೆಚ್ ಇತ್ಯಾದಿಗಳ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, 18-24 ಬಿಪಿ ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು ಉತ್ತಮ ಇಳುವರಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಹಾನಿಯನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟಲು, 94 ° C ನಲ್ಲಿ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು 30 ಸೆಕೆಂಡಿಗೆ ಅಥವಾ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರತಿ ಚಕ್ರಕ್ಕೆ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬೇಕು, ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆಗೆ ಮೊದಲು ತಾಪಮಾನವನ್ನು 94 ° C ಗೆ ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಸಮಯವು 1 ನಿಮಿಷಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಇರಬೇಕು. ಇದಲ್ಲದೆ, ವಿಸ್ತರಣೆಯ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸುಮಾರು 68 ° C ಗೆ ಹೊಂದಿಸುವುದು ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಸಮಯವನ್ನು 1 kb/min ದರಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ ದೀರ್ಘ ತುಣುಕುಗಳ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸಬಹುದು.

ಪ್ರಶ್ನೆ: ಪಿಸಿಆರ್‌ನ ವರ್ಧನೆಯ ನಿಷ್ಠೆಯನ್ನು ಹೇಗೆ ಸುಧಾರಿಸುವುದು?

ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯೊಂದಿಗೆ ವಿವಿಧ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯ ದೋಷದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ ಕಂಡುಬಂದಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ತಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳಲ್ಲಿ, ಪಿಎಫ್‌ಯು ಕಿಣ್ವವು ಕಡಿಮೆ ದೋಷದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ (ಲಗತ್ತಿಸಲಾದ ಕೋಷ್ಟಕವನ್ನು ನೋಡಿ). ಕಿಣ್ವದ ಆಯ್ಕೆಯ ಜೊತೆಗೆ, ಸಂಶೋಧಕರು ಪಿಸಿಆರ್ ಮ್ಯುಟೇಶನ್ ದರವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು, ಬಫರ್ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸುವುದು, ಥರ್ಮೋಸ್ಟೇಬಲ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಸೈಕಲ್ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸುವುದು.

ನಿಮ್ಮ ಸಂದೇಶವನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ಬರೆದು ನಮಗೆ ಕಳುಹಿಸಿ

ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ವರ್ಗಗಳು

ನಮ್ಮನ್ನು ಏಕೆ ಆರಿಸಬೇಕು

ಸ್ಥಾಪನೆಯಾದಾಗಿನಿಂದ, ನಮ್ಮ ಕಾರ್ಖಾನೆಯು ತತ್ವವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮೊದಲ ವಿಶ್ವ ದರ್ಜೆಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುತ್ತಿದೆ
ಮೊದಲು ಗುಣಮಟ್ಟದ. ನಮ್ಮ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು ಉದ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಖ್ಯಾತಿಯನ್ನು ಗಳಿಸಿವೆ ಮತ್ತು ಹೊಸ ಮತ್ತು ಹಳೆಯ ಗ್ರಾಹಕರಲ್ಲಿ ಮೌಲ್ಯಯುತವಾದ ವಿಶ್ವಾಸವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ.

ವಿಚಾರಣೆ