TGuide FFPE DNA ಒಂದು ಹಂತದ ಕಿಟ್

A-1 ಆರಂಭಿಕ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಥವಾ ವೈರಸ್‌ಗಳ ಕಡಿಮೆ ಸಾಂದ್ರತೆ-ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಥವಾ ವೈರಸ್‌ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಉತ್ಕೃಷ್ಟಗೊಳಿಸಿ.

ಎ -2 ಮಾದರಿಗಳ ಸಾಕಷ್ಟು ಲೈಸಿಸ್-ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಲೈಸಿಸ್ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿಲ್ಲ. 1-2 ಬಾರಿ ಪಲ್ಸ್-ಸುಳಿಯ ಮೂಲಕ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ. - ಪ್ರೋಟೀನೇಸ್ ಕೆ ಯ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಇಳಿಕೆಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಜೀವಕೋಶದ ಲೈಸಿಸ್ ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ - ಸಾಕಷ್ಟು ಬೆಚ್ಚಗಿನ ಸ್ನಾನದ ಸಮಯದಿಂದಾಗಿ ಸಾಕಷ್ಟು ಜೀವಕೋಶದ ಲೈಸಿಸ್ ಅಥವಾ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅವನತಿ. ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಸಣ್ಣ ತುಂಡುಗಳಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸಿ ಸ್ನಾನದ ಸಮಯವನ್ನು ವಿಸ್ತರಿಸಲು ಲೈಸೆಟ್ನಲ್ಲಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಅವಶೇಷಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಎ -3 ಸಾಕಷ್ಟು ಡಿಎನ್ಎ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ. -ಲೈಸೆಟ್ ಅನ್ನು ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸುವ ಮೊದಲು 100% ಎಥೆನಾಲ್ ಬದಲಿಗೆ ಎಥೆನಾಲ್ ಅಥವಾ ಕಡಿಮೆ ಶೇಕಡಾವಾರು ಸೇರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ.

ಎ -4 ಎಲುಶನ್ ಬಫರ್‌ನ ಪಿಹೆಚ್ ಮೌಲ್ಯವು ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ. -pH ಅನ್ನು 8.0-8.3 ನಡುವೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಿ.

ಎಲುಯೆಂಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ಎಥೆನಾಲ್.

-ಎಲುಯೆಂಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಉಳಿದಿರುವ ತೊಳೆಯುವ ಬಫರ್ PW ಇದೆ. ಎಥೆನಾಲ್ ಅನ್ನು ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು 3-5 ನಿಮಿಷಗಳವರೆಗೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುವ ಮೂಲಕ ತೆಗೆಯಬಹುದು, ಮತ್ತು ನಂತರ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಅಥವಾ 50 ℃ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್ ಅನ್ನು 1-2 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಇರಿಸಬಹುದು.

ಎ -1 ಮಾದರಿ ತಾಜಾವಾಗಿಲ್ಲ. - ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಕುಸಿದಿದೆಯೇ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಧನಾತ್ಮಕ ಮಾದರಿ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಣವಾಗಿ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ.

A-2 ಅಸಮರ್ಪಕ ಪೂರ್ವ ಚಿಕಿತ್ಸೆ. - ಅತಿಯಾದ ದ್ರವ ಸಾರಜನಕ ಗ್ರೈಂಡಿಂಗ್, ತೇವಾಂಶವನ್ನು ಮರಳಿ ಪಡೆಯುವುದು ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದ ಮಾದರಿಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ.

ಪೂರ್ವಭಾವಿ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳು ವಿಭಿನ್ನ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಬದಲಾಗಬೇಕು. ಸಸ್ಯದ ಮಾದರಿಗಳಿಗಾಗಿ, ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ರುಬ್ಬುವಂತೆ ನೋಡಿಕೊಳ್ಳಿ. ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಏಕರೂಪದ ಅಥವಾ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದಲ್ಲಿ ಪುಡಿಮಾಡಿ. ಜಿ+ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಮತ್ತು ಯೀಸ್ಟ್‌ನಂತಹ ಮುರಿಯಲು ಕಷ್ಟಕರವಾದ ಸೆಲ್ ವಾಲ್‌ಗಳ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಸೆಲ್ ಗೋಡೆಗಳನ್ನು ಒಡೆಯಲು ಲೈಸೋಜೈಮ್, ಲೈಟಿಕೇಸ್ ಅಥವಾ ಯಾಂತ್ರಿಕ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಬಳಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ.

4992201/4992202 ಸಸ್ಯ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಕಿಟ್ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಕಾಲಮ್ ಆಧಾರಿತ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ. ಇದು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ವಿವಿಧ ಸಸ್ಯ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಹಾಗೆಯೇ ಸಸ್ಯದ ಒಣ ಪುಡಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಹೈ-ಡಿಎನ್ಎಸೆಕ್ಯೂರ್ ಪ್ಲಾಂಟ್ ಕಿಟ್ ಕೂಡ ಕಾಲಮ್ ಆಧಾರಿತವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಫೀನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ, ಇದು ಸುರಕ್ಷಿತ ಮತ್ತು ವಿಷಕಾರಿಯಲ್ಲದಂತೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪಾಲಿಫಿನಾಲ್ ಅಂಶವಿರುವ ಸಸ್ಯಗಳಿಗೆ ಇದು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. 4992709/4992710 ಡಿಎನ್ಎಕ್ವಿಕ್ ಪ್ಲಾಂಟ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ದ್ರವ ಆಧಾರಿತ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ. ಫೀನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಕೂಡ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ. ಮಾದರಿ ಆರಂಭದ ಮೊತ್ತಕ್ಕೆ ಯಾವುದೇ ಮಿತಿಯಿಲ್ಲದೆ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಸರಳ ಮತ್ತು ವೇಗವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಬಳಕೆದಾರರು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಮೊತ್ತವನ್ನು ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಹೆಚ್ಚಿನ ಇಳುವರಿಯೊಂದಿಗೆ ದೊಡ್ಡ ಗಾತ್ರದ ಜಿಡಿಎನ್ಎ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಬಹುದು.

ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಟಿಐಎನಾಂಪ್ ಬ್ಲಡ್ ಡಿಎನ್ಎ ಕಿಟ್ ಮೂಲಕ ಮಾನವ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಗಳ ವಿವಿಧ ಸಂಪುಟಗಳಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಗಿದೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿವೆ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖವಾಗಿ ಮಾತ್ರ ಪಟ್ಟಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ನಿಜವಾದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮಾದರಿಗಳ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ.

ರಕ್ತ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುವ ಡಿಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸೂಚನೆಯ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅನ್ನು ಸರಳವಾಗಿ ಬದಲಿಸುವ ಮೂಲಕ ಈ ಎರಡು ಕಿಟ್ಗಳಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾದ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ರಕ್ತ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುವ ಡಿಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯನ್ನು ಮಾಡಬಹುದು. ರಕ್ತ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುವಿಕೆಯ ಡಿಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ನ ಮೃದು ಪ್ರತಿಯನ್ನು ವಿನಂತಿಸಿದ ನಂತರ ನೀಡಬಹುದು.

ತಾಜಾ ಮಾದರಿಯನ್ನು 1 ಮಿಲಿ ಪಿಬಿಎಸ್, ಸಾಮಾನ್ಯ ಲವಣಯುಕ್ತ ಅಥವಾ ಟಿಇ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಿ. ಮಾದರಿಯನ್ನು ಹೋಮೋಜೆನೈಸರ್ ಮೂಲಕ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮೂಲಕ ಕೊಳವೆಯ ಕೆಳಭಾಗಕ್ಕೆ ಅವಕ್ಷೇಪವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ. ಸೂಪರ್ನಾಟಂಟ್ ಅನ್ನು ವಿಲೇವಾರಿ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಅವಕ್ಷೇಪವನ್ನು 200 μl ಬಫರ್ GA ನೊಂದಿಗೆ ಮರುಹೊಂದಿಸಿ. ಸೂಚನೆಯ ಪ್ರಕಾರ ಕೆಳಗಿನ ಡಿಎನ್ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣವನ್ನು ಮಾಡಬಹುದು.

ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ, ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ದೇಹದ ದ್ರವ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಜಿಡಿಎನ್‌ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಟಿಐಎನಾಂಪ್ ಮೈಕ್ರೋ ಡಿಎನ್‌ಎ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಸೀರಮ್/ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ ವೈರಸ್ ಜಿಡಿಎನ್ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಟಿಐಎನಾಂಪ್ ವೈರಸ್ ಡಿಎನ್ಎ/ಆರ್ಎನ್ಎ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಜಿಡಿಎನ್ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಟಿಐಎನಾಂಪ್ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಡಿಎನ್ಎ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ (ಧನಾತ್ಮಕ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳಿಗೆ ಲೈಸೋಜೈಮ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಬೇಕು). ಲಾಲಾರಸದ ಮಾದರಿಗಳಿಗಾಗಿ, ಹೈ-ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಕಿಟ್ ಮತ್ತು ಟಿಐಎನ್ಯಾಂಪ್ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಡಿಎನ್‌ಎ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.

ಶಿಲೀಂಧ್ರದ ಜೀನೋಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಡಿಎನ್ಎ ಸೆಕ್ಯೂರ್ ಪ್ಲಾಂಟ್ ಕಿಟ್ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎಕ್ವಿಕ್ ಪ್ಲಾಂಟ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಯೀಸ್ಟ್ ಜೀನೋಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಗಾಗಿ, TIANamp ಯೀಸ್ಟ್ ಡಿಎನ್ಎ ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ (ಲಿಟಿಕೇಸ್ ಅನ್ನು ಸ್ವಯಂ-ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಬೇಕು).