TIANcombi DNA Lyse & Det PCR ಕಿಟ್

ಪಿಸಿಆರ್ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ವಿವಿಧ ವಸ್ತುಗಳಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ತ್ವರಿತ ಶುದ್ಧೀಕರಣ.

TIANcombi DNA Lyse & Det PCR ಕಿಟ್ ಒಂದು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ಯಾಕೇಜಿಂಗ್ ವಿನ್ಯಾಸವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ, ಇದು ತ್ವರಿತ ಜೀನೋಮಿಕ್ DNA ತಯಾರಿಕೆ ಮತ್ತು PCR ವರ್ಧನೆಗೆ ಎಲ್ಲಾ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಇದು ವಿವಿಧ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ (ಸಸ್ಯ ಅಂಗಾಂಶಗಳು, ಬೀಜಗಳು, ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳು, ರಕ್ತ, ಯೀಸ್ಟ್ ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ) ಮತ್ತು ನಂತರದ ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆ ಮತ್ತು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆಯ ಒಂದು ಹಂತದ ಜೀನೋಮ್ ಡಿಎನ್ಎ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೋಟೀನ್, ಆರ್ ಎನ್ ಎ ಮತ್ತು ಇತರ ದ್ವಿತೀಯ ಚಯಾಪಚಯ ತೆಗೆಯುವಿಕೆ, ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಹಾಗೂ ಎಥೆನಾಲ್ ಅವಕ್ಷೇಪನ ಕ್ರಮಗಳು ಸಂಪೂರ್ಣ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ, ಇದು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ಸರಳ ಮತ್ತು ವೇಗವಾಗಿಸುತ್ತದೆ. ಉತ್ಪನ್ನದ ಗುಣಮಟ್ಟ ಸ್ಥಿರ ಮತ್ತು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಾಗಿದೆ.

ಈ ಕಿಟ್‌ನಿಂದ ಒದಗಿಸಲಾದ 2 × ಡೆಟ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಸ್ಟರ್‌ಮಿಕ್ಸ್ ಹೆಚ್ಚು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಾರಕವಾಗಿದ್ದು ಅದು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳಂತಹ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆಯುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲದೇ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಕಾರಕವು Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್, dNTP ಗಳು, MgCl ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ2, ಬಫರ್, ಹಾಗೆಯೇ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ವರ್ಧಕ, ಆಪ್ಟಿಮೈಜರ್ ಮತ್ತು ಸ್ಟೆಬಿಲೈಜರ್. ಕಾರಕದ ಅನ್ವಯವು ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ವೇಗ, ಸರಳ, ಸೂಕ್ಷ್ಮ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರವಾಗಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಈ ಕಿಟ್ ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಹೈ-ಥ್ರೋಪುಟ್ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್‌ಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.

ಬೆಕ್ಕು ಇಲ್ಲ ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಗಾತ್ರ
4992527 20 µl × 50 rxn
4992528 20 µl × 200 rxn

 

 


ಉತ್ಪನ್ನ ವಿವರ

ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಉದಾಹರಣೆ

FAQ

ಉತ್ಪನ್ನ ಟ್ಯಾಗ್‌ಗಳು

ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು

And ಸರಳ ಮತ್ತು ವೇಗ: ದ್ರವರೂಪದ ಸಾರಜನಕ ರುಬ್ಬುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲದೇ 5 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ಅಂಗಾಂಶಗಳಿಂದ ಡಿಎನ್ ಎ ತೆಗೆಯಬಹುದು.
Applications ವ್ಯಾಪಕ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳು: ಸಸ್ಯದ ಎಲೆಗಳು, ಬೀಜಗಳು, ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳು, ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಗಳು (ತಾಜಾ ರಕ್ತ, ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುವಿಕೆ, ರಕ್ತ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುವಿಕೆ, ಒಣಗಿದ ರಕ್ತದ ಕಲೆಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿ), ಯೀಸ್ಟ್ ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ.
Comp ಬಲವಾದ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ: ಪಿಸಿಆರ್ ಕಾರಕವು ವಿವಿಧ ಮಾದರಿ ಮೂಲಗಳಿಂದ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ಡಿಎನ್ಎ ವರ್ಧನೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.

ಅರ್ಜಿಗಳನ್ನು

Ene ವಂಶವಾಹಿ ಪತ್ತೆ: ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣದ ಜೀನ್ ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ಸೂಕ್ತ ಆಯ್ಕೆ.

ಪ್ರಮುಖ ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು

Cotton ಹತ್ತಿ ಎಲೆಗಳಂತಹ ಉನ್ನತ ಮಟ್ಟದ ಫೀನಾಲ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಮಾದರಿ ಇನ್ಪುಟ್ ಪ್ರಮಾಣವು ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾಗಿ 0.4 ಮಿಗ್ರಾಂಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರಬೇಕು, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ.

ಎಲ್ಲಾ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ODM/OEM ಗಾಗಿ ಕಸ್ಟಮೈಸ್ ಮಾಡಬಹುದು. ವಿವರಗಳಿಗಾಗಿ,ದಯವಿಟ್ಟು ಕಸ್ಟಮೈಸ್ಡ್ ಸೇವೆ (ODM/OEM) ಕ್ಲಿಕ್ ಮಾಡಿ


  • ಹಿಂದಿನದು:
  • ಮುಂದೆ:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Exampl 5 ಮಿಗ್ರಾಂ ಎಲೆಗಳು ಮತ್ತು ಜೋಳ, ಗೋಧಿ, ಅಕ್ಕಿ, ಸೋಯಾಬೀನ್ ಮತ್ತು ಹತ್ತಿಯ ಬೀಜಗಳಿಂದ ಡಿಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾಯಿತು. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಪಿಸಿಆರ್‌ನಿಂದ ಡಿಎನ್‌ಎ ವರ್ಧಿಸಿತು. ಒಟ್ಟು 20 μl ಎಲುಯೆಂಟ್‌ಗಳಿಂದ 6 μl DNA ಅನ್ನು ಪ್ರತಿ ಲೇನ್‌ಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
    1: ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ ಜೀನೋಮ್; 2: ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಬಿಡಿ; 3: ಬೀಜ ಮಾದರಿಗಳು; 4: NTC; 5: D2000 ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು
    Experimental Example ಎಂ: TIANGEN ಮಾರ್ಕರ್ D2000; 1: ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ;
    2-7: ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್ ಮೇಲೆ ಒಣಗಿದ ರಕ್ತದ ಕಲೆಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಕ್ರಮವಾಗಿ 1-6; 8: ನಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ.
    3 ಎಂಎಂ ಪಂಚರ್ ಅನ್ನು ಫಿಲ್ಟರ್ ಪೇಪರ್‌ನಿಂದ ಒಣಗಿದ ರಕ್ತದ ಕಲೆಗಳನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪರೀಕ್ಷೆಯ ವಸ್ತುವಾಗಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು.
    ಒಟ್ಟು 20 μl ಎಲುಯೆಂಟ್‌ಗಳಿಂದ 6 μl DNA ಅನ್ನು ಪ್ರತಿ ಲೇನ್‌ಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
    Experimental Exampl ಎಂ: TIANGEN ಮಾರ್ಕರ್ D2000; 1: ಧನಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ (ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಆಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು); 2-7: ಸೇರಿಸಿದ ರಕ್ತದ ಪ್ರಮಾಣ ಕ್ರಮವಾಗಿ 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl ಮತ್ತು 60 μl; 8-13: ಸೇರಿಸಿದ ರಕ್ತದ ಪ್ರಮಾಣ ಕ್ರಮವಾಗಿ 10 μl, 20 μl, 30 μl, 40 μl, 50 μl ಮತ್ತು 60 μl; 14: NTC
    ಒಟ್ಟು 20 μl ಎಲುಯೆಂಟ್‌ಗಳಿಂದ 6 μl DNA ಅನ್ನು ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್‌ಗೆ ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
    ಪ್ರ: ಯಾವುದೇ ವರ್ಧಕ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳಿಲ್ಲ

    A-1 ಟೆಂಪ್ಲೇಟು

    Temp ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ಅಥವಾ ಟಕ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇತ್ಯಾದಿ ——— DNA ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ ಅಥವಾ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಿಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ.

    Temp ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿಲ್ಲ -— ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಮತ್ತು ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ.

    Mp ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅವನತಿ —— ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಪುನಃ ತಯಾರಿಸಿ.

    ಎ -2 ಪ್ರೈಮರ್

    Pri ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಕಳಪೆ ಗುಣಮಟ್ಟ —— ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಪುನಃ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿ.

    Mer ಪ್ರೈಮರ್ ಅವನತಿ —— ಸಂರಕ್ಷಣೆಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪರಿವರ್ತಿಸಿ. ಬಹು ಘನೀಕರಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಕರಗುವಿಕೆ ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ 4 ° C ಕ್ರಯೋಪ್ರೆಸರ್ವ್ ಮಾಡುವುದನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.

    Pri ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಅಸಮರ್ಪಕ ವಿನ್ಯಾಸ (ಉದಾ. ಪ್ರೈಮರ್ ಉದ್ದವು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ನಡುವೆ ಡೈಮರ್ ರೂಪುಗೊಂಡಿದೆ, ಇತ್ಯಾದಿ) -ಮರುವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು (ಪ್ರೈಮರ್ ಡೈಮರ್ ಮತ್ತು ಸೆಕೆಂಡರಿ ಸ್ಟ್ರಕ್ಚರ್ ರಚನೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ)

    A-3 Mg2+ಏಕಾಗ್ರತೆ

    ಎಂಜಿ2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ —— Mg ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ: Mg ಅನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಿ2+ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ2+ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

    ಎ -4 ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ

    An ಹೆಚ್ಚಿನ ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವು ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಬಂಧನದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ. -— ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 2 ° C ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಿ.

    ಎ -5 ವಿಸ್ತರಣೆ ಸಮಯ

    Extension ಚಿಕ್ಕ ವಿಸ್ತರಣೆ ಸಮಯ —— ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ.

    ಪ್ರ: ತಪ್ಪು ಧನಾತ್ಮಕ

    ವಿದ್ಯಮಾನ: samplesಣಾತ್ಮಕ ಮಾದರಿಗಳು ಕೂಡ ಗುರಿ ಅನುಕ್ರಮ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ.

    ಎ -1 ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಲಿನ್ಯ

    Target ಗುರಿಯ ಅನುಕ್ರಮ ಅಥವಾ ವರ್ಧನೆಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಅಡ್ಡ ಮಾಲಿನ್ಯ -— ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ನೆಗೆಟಿವ್ ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ನಲ್ಲಿ ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಹೊಂದಿರುವ ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ಅನ್ನು ಪೈಪ್ ಮಾಡಬೇಡಿ ಅಥವಾ ಅವುಗಳನ್ನು ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್ ನಿಂದ ಚೆಲ್ಲಬೇಡಿ. ಕಾರಕಗಳು ಅಥವಾ ಸಲಕರಣೆಗಳನ್ನು ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ತೊಡೆದುಹಾಕಲು ಆಟೋಕ್ಲೇವ್ ಮಾಡಬೇಕು ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಸ್ತಿತ್ವವನ್ನು ನಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಮೂಲಕ ನಿರ್ಧರಿಸಬೇಕು.

    Ag ಕಾರಕ ಮಾಲಿನ್ಯ --— ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.

    ಎ -2 ಪ್ರಧಾನr

    ಎಂಜಿ2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ —— Mg ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ: Mg ಅನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಿ2+ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ2+ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

    Pri ಅಸಮರ್ಪಕ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ, ಮತ್ತು ಉದ್ದೇಶಿತ ಅನುಕ್ರಮವು ಗುರಿಯಲ್ಲದ ಅನುಕ್ರಮದೊಂದಿಗೆ ಹೋಮಾಲಜಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. —— ಮರು-ವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು.

    ಪ್ರ: ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆ

    ವಿದ್ಯಮಾನ: ಪಿಸಿಆರ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ನಿರೀಕ್ಷಿತ ಗಾತ್ರಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ದೊಡ್ಡದು ಅಥವಾ ಚಿಕ್ಕದು, ಅಥವಾ ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು ಸಂಭವಿಸುತ್ತವೆ.

    ಎ -1 ಪ್ರೈಮರ್

    Pri ಕಳಪೆ ಪ್ರೈಮರ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ

    —— ಮರು-ವಿನ್ಯಾಸ ಪ್ರೈಮರ್.

    Pri ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಮತ್ತು ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ.

    A-2 Mg2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ

    M ದಿ ಎಂಜಿ2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— Mg2+ ಏಕಾಗ್ರತೆಯನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ: Mg ಅನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಿ2+ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ2+ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

    ಎ -3 ಥರ್ಮೋಸ್ಟೇಬಲ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್

    En ಅತಿಯಾದ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ —— 0.5 ಕಿ ಯ ಅಂತರದಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ.

    ಎ -4 ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ

    Ne ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವು ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ——ಅನೀಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಅಥವಾ ಎರಡು ಹಂತದ ಅನೀಲಿಂಗ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಳವಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ

    ಎ -5 ಪಿಸಿಆರ್ ಚಕ್ರಗಳು

    P ಹಲವಾರು ಪಿಸಿಆರ್ ಆವರ್ತಗಳು —— ಪಿಸಿಆರ್ ಆವರ್ತಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ.

    ಪ್ರ: ತೇಪೆ ಅಥವಾ ಸ್ಮೀಯರ್ ಬ್ಯಾಂಡ್‌ಗಳು

    ಎ -1 ಪ್ರೈಮರ್—— ಕಳಪೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ —— ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಮರು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿ, ಪ್ರೈಮರ್‌ನ ಸ್ಥಾನವನ್ನು ಮತ್ತು ಉದ್ದವನ್ನು ಅದರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಬದಲಾಯಿಸಿ; ಅಥವಾ ನೆಸ್ಟೆಡ್ ಪಿಸಿಆರ್ ನಿರ್ವಹಿಸಿ.

    A-2 ಟೆಂಪ್ಲೇಟು DNA

    —— ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಶುದ್ಧವಲ್ಲ —— ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್ಎಯನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಿಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೊರತೆಗೆಯಿರಿ.

    A-3 Mg2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ

    ——Mg2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— Mg ಅನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ2+ ಏಕಾಗ್ರತೆ: Mg ಅನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸಿ2+ ಸೂಕ್ತ ಎಮ್‌ಜಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲು 0.5 ಎಂಎಂ ಮಧ್ಯಂತರದೊಂದಿಗೆ 1 ಎಮ್‌ಎಮ್‌ನಿಂದ 3 ಎಂಎಮ್‌ವರೆಗಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸರಣಿಯಿಂದ ಏಕಾಗ್ರತೆ2+ ಪ್ರತಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗೆ ಏಕಾಗ್ರತೆ.

    A-4 dNTP

    ——DNTP ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ತುಂಬಾ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ —— dNTP ಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ

    ಎ -5 ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ

    —— ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ ——ಅನೀಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿ

    ಎ -6 ಚಕ್ರಗಳು

    —— ಹಲವು ಚಕ್ರಗಳು —— ಸೈಕಲ್ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಿ

    ಪ್ರಶ್ನೆ: 50 μl ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಎಷ್ಟು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್ಎ ಸೇರಿಸಬೇಕು?
    ytry
    ಪ್ರ: ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ವರ್ಧಿಸುವುದು ಹೇಗೆ?

    ಸೂಕ್ತವಾದ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ಮೊದಲ ಹಂತವಾಗಿದೆ. 3'-5 'ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಕೊರತೆಯಿಂದಾಗಿ ನಿಯಮಿತ ಟಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಪ್ರೂಫ್ ರೀಡ್ ಮಾಡಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಅಸಾಮರಸ್ಯವು ತುಣುಕುಗಳ ವಿಸ್ತರಣೆ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ನಿಯಮಿತ ಟಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ 5 ಕೆಬಿಗಿಂತ ದೊಡ್ಡದಾದ ಗುರಿ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ. ವಿಶೇಷ ಮಾರ್ಪಾಡು ಅಥವಾ ಇತರ ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಟಾಕ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕಿನ ವರ್ಧನೆಯ ಅಗತ್ಯತೆಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸಲು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು. ಇದರ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ, ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕುಗಳ ವರ್ಧನೆಗೆ ಪ್ರೈಮರ್ ವಿನ್ಯಾಸ, ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯ, ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಸಮಯ, ಬಫರ್ ಪಿಹೆಚ್ ಇತ್ಯಾದಿಗಳ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, 18-24 ಬಿಪಿ ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು ಉತ್ತಮ ಇಳುವರಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಹಾನಿಯನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟಲು, 94 ° C ನಲ್ಲಿ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ ಸಮಯವನ್ನು 30 ಸೆಕೆಂಡಿಗೆ ಅಥವಾ ಕಡಿಮೆ ಪ್ರತಿ ಚಕ್ರಕ್ಕೆ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬೇಕು, ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆಗೆ ಮೊದಲು ತಾಪಮಾನವನ್ನು 94 ° C ಗೆ ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಸಮಯವು 1 ನಿಮಿಷಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಇರಬೇಕು. ಇದಲ್ಲದೆ, ವಿಸ್ತರಣೆಯ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸುಮಾರು 68 ° C ಗೆ ಹೊಂದಿಸುವುದು ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಣೆಯ ಸಮಯವನ್ನು 1 kb/min ದರಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ ದೀರ್ಘ ತುಣುಕುಗಳ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸಬಹುದು.

    ಪ್ರಶ್ನೆ: ಪಿಸಿಆರ್‌ನ ವರ್ಧನೆಯ ನಿಷ್ಠೆಯನ್ನು ಹೇಗೆ ಸುಧಾರಿಸುವುದು?

    ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯೊಂದಿಗೆ ವಿವಿಧ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಮೂಲಕ ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯ ದೋಷದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಇಲ್ಲಿಯವರೆಗೆ ಕಂಡುಬಂದಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ತಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ಗಳಲ್ಲಿ, ಪಿಎಫ್‌ಯು ಕಿಣ್ವವು ಕಡಿಮೆ ದೋಷದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ (ಲಗತ್ತಿಸಲಾದ ಕೋಷ್ಟಕವನ್ನು ನೋಡಿ). ಕಿಣ್ವದ ಆಯ್ಕೆಯ ಜೊತೆಗೆ, ಸಂಶೋಧಕರು ಪಿಸಿಆರ್ ಮ್ಯುಟೇಶನ್ ದರವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು, ಬಫರ್ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿಸುವುದು, ಥರ್ಮೋಸ್ಟೇಬಲ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಸೈಕಲ್ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸುವುದು.

    ನಿಮ್ಮ ಸಂದೇಶವನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ಬರೆದು ನಮಗೆ ಕಳುಹಿಸಿ